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细胞表面表达的氧化酶的独特亚组

更新时间:2019-04-27 点击数:346

细胞表面表达的氧化酶的独特亚组

  血管粘附蛋白-1(VAP-1)是同型二聚体糖蛋白,属于细胞表面表达的氧化酶的独特亚组。在成人中,内皮VAP-1以酶活性依赖性和酶活性非依赖性方式支持白细胞滚动,牢固粘附和迁移。在这里,我们研究了人类个体发育过程中VAP-1的诱导和功能。我们显示在胚胎第7周已经在平滑肌中发现了VAP-1。

秒速时时彩  在肝脏的窦状隙,肾脏的管周毛细血管中,在毛细血管中,VAP-1表达存在明显的时间依赖性转换。心脏,以及肠道固有层的小静脉。胎儿VAP-1二聚化,具有酶活性。胎儿型小静脉中的VAP-1能够结合脐带血淋巴细胞。也,在人脐静脉内皮细胞上腺病毒转染的VAP-1参与脐带血淋巴细胞在生理剪切应力条件下的滚动和牢固粘附。我们得出结论,VAP-1是从早期在人体血管中合成的,并且在出生前它已在功能上完整。因此,VAP-1可能对子宫内的氧化酶活性起关键作用,并证明对于人类个体发育期间的淋巴细胞运输是重要的。

  已经描述了针对人VAP-1(2D10和TK8-18)和针对小鼠VAP-1(TK10-79)的单克隆抗体(mAb)。26,28 2D10和TK8-14是功能阻断性单克隆抗体仅与冰冻切片工作,而TK10-79,这是与人VAP-1交叉反应性,用石蜡切片的工作原理。抗CD31 mAb来自Dako(Glostrup,Denmark)。作为阴性对照,针对人类白细胞抗原(HLA)I类的mAb(针对小鼠MAdCAM-1的MECA-367和针对鸡T细胞的3G6)不与人抗原反应,并且针对人类白细胞抗原(HLA)I类的结合但非粘附阻断的mAb HB151用过的。8,29,30

  抗水剂汇聚如所述使用间接免疫过氧化物酶染色进行丙酮固定的冷冻切片的染色。3石蜡切片的染色是在抗原修复和后续染色用试剂盒的Vectastain抗生物素蛋白-过氧化物酶方法的柠檬酸盐缓冲液(Vector Laboratories公司,Burlingame的,CA)如所描述的用微波处理来完成。对所有样品进行VAP-1,CD31和阴性对照染色。使用配备有UPlanF1 20x / 0.50数值孔径[NA] Ph1或UPlanF1 40x / 0.75NA Ph2物镜的Olympus BX60显微镜获得图像。使用ColorView 12相机(Olympus Soft Imaging Solutions,Münster,Germany)获取图像。



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